Pesquisadores do OCRC publicam artigo na importante revista JoVE e geram um vídeo sobre o método desenvolvido

Os pesquisadores Fernando Rivera e Vanessa Furino, sob supervisão do prof. Dr. Carlos Sponton, publicaram o artigo Investigation of Beige Fat Biology and Metabolism Using the CRISPR SunTag-p65-HSF1 Activation System na importante Journal of Visualized Experiments (JoVE).

O trabalho contou com um sistema de ativação CRISPR (Repetições Palindrômicas Curtas Agrupadas e Regularmente Interespaçadas), SunTag-p65-HSF1 (SPH), uma tecnologia desenvolvida recentemente que combina componentes de mediadores de ativação sinérgica (SAMs) com os ativadores SunTag. Este sistema permite a superexpressão de genes únicos ou múltiplos, projetando um RNA guia (sgRNA).

Neste estudo, um camundongo SPH previamente desenvolvido foi usado para gerar um camundongo condicional expressando SPH em adipócitos (linhagem Cre da adiponectina), denominado AdipoSPH. Para induzir um fenótipo de browning (conversão de gordura branca para bege), um vírus adenoassociado (AAV) carregando sgRNA direcionado ao gene endógeno Prdm16 (um fator de transcrição bem estabelecido relacionado ao desenvolvimento de gorduras marrom e bege) foi injetado no tecido adiposo branco inguinal (iWAT) do camundongo AdipoSPH.

Este modelo de camundongo induziu a expressão de Prdm16 endógeno e ativou genes termogênicos. Além disso, a superexpressão de Prdm16 induzida por SPH in vitro aumentou o consumo de oxigênio de adipócitos bege, semelhante ao observado em um modelo de camundongo transgênico para Prdm16.

Os resultados obtidos com este protocolo permitem concluir que o camundongo AdipoSPH é um modelo versátil e econômico para investigar múltiplos genes e elementos regulatórios dos adipócitos e ainda possuir um conhecimento profundo da biologia do tecido adiposo.

Confira e compartilhe o artigo e o vídeo: https://app.jove.com/v/64849/investigation-of-beige-fat-biology-and-metabolism-using-the-crispr-suntag-p65-hsf1-activation-system